TC20細胞計數(shù)儀在實際應(yīng)用中應(yīng)該如何進行操作？

　　TC20細胞計數(shù)儀采用革新性的血細胞計數(shù)室設(shè)計，能使細胞呈單層、靜止、均一的狀態(tài)平鋪于檢測室中，確保了多個視野的光學(xué)聚焦的性，消除了信號重疊和漂移現(xiàn)象。此外，該技術(shù)還為那些檢測流動中的細胞某一單一視野、通過移動樣品來聚焦成像的儀器提供了解決方案。
 

　　TC20細胞計數(shù)儀的原理：

　　電阻抗檢測原理血細胞是相對不良導(dǎo)體,當(dāng)血細胞懸浮電解質(zhì)中,將小孔管插入細胞懸液,使其管內(nèi)充滿稀釋液,當(dāng)一個細胞通過小孔時,瞬間引起電壓變化出現(xiàn)一個脈沖信號,細胞體積越大,引起脈沖越大,產(chǎn)生脈沖振幅越高。

　　流式細胞術(shù)加光學(xué)檢測原理利用流式細胞術(shù)使單個細胞隨著流體動力聚集的鞘流液在通過激光照射的檢測區(qū)時,使光束發(fā)生折射、衍射和散射,散射光光檢測器接受后產(chǎn)生脈沖,脈沖大小與被照細胞的大小成正比,脈沖的數(shù)量代表了被照細胞的數(shù)量。
 

　　TC20細胞計數(shù)儀怎么操作：

　　1、將計數(shù)板及蓋玻片擦拭干凈,并將蓋玻片蓋在計數(shù)板上。

　　2、輕輕吹打細胞懸液,使細胞均勻分布;吸出少許細胞懸液滴在細胞入口,使細胞懸液充滿蓋玻片和計數(shù)板之間,靜置1-2min,使細胞沉降;注意蓋玻片下不要有氣泡,也避免細胞懸液進入旁邊的槽中。

　　3、在顯微鏡下對A/B/C/D四個大格內(nèi)的細胞進行計數(shù),壓在大格四周邊線上的細胞只計數(shù)壓在2條邊線上的細胞(如右側(cè)和下方);若鏡下有2個細胞組成的細胞團,則應(yīng)按單個細胞計算;若細胞團數(shù)量較多,占細胞總量的10%左右,則說明細胞分散不好會導(dǎo)致計算不準(zhǔn)確,需要重新制備細胞懸液。

　　4、按公式計數(shù)細胞數(shù)量:細胞數(shù)/mL=四個大格內(nèi)細胞總數(shù)×104/4?(每一個大格的體積為長1mm×寬1mm×高0.1mm=0.1mm3,1mL=1000mm3,因此計算時需×104)。
 

　　使用TC20細胞計數(shù)儀的注意事項：

　　1、務(wù)必使分散成單個細胞,取樣計數(shù)前,充分混勻細胞懸液。

　　2、顯微鏡下計數(shù)時,遇到2個以上細胞組成的細胞團,應(yīng)按單個細胞計算。如果細胞團>10%,說明細胞分散不充分。

　　3、如果計數(shù)時細胞密度較大,數(shù)起來較麻煩也不容易計準(zhǔn),所以如果感覺細胞數(shù)量較多時,可以從細胞懸液中吸取10至100u1,用少量PBS稀釋后再作計數(shù)。

　　4、注意蓋玻片下不要有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中。

　　5、蓋玻片要盡量擦干凈,特別是不能帶有纖維,否則會造成體積不準(zhǔn)。另外四個大格中平均每個大格的細胞數(shù)宜在50-150左右,這樣總數(shù)會比較準(zhǔn)確。